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Reagenzien zur Erstellung von eigenen Magnetpartikel-Chemilumineszenz-Immunoassays (MPCLIA)

Reagenzien zur Erstellung von eigenen Magnetpartikel-Chemilumineszenz-Immunoassays (MPCLIA)
Einführung

Der Magnetpartikel (MP)-Chemilumineszenz-Immunoassay (CLIA) mit ist eine Analysemethode, die die Flexibilität von magnetischen Beads mit der Empfindlichkeit und Spezifität von CLIA kombiniert. Anstelle der Immobilisierung von Proteinen oder Antikörpern in der Well-Platte bieten magnetische Beads eine erhebliche Vergrößerung der Probenkontaktfläche, der Erfassungseffizienz und der Automatisierungsmöglichkeiten. MPCLIA wird daher immer häufiger in der Krankheitsdiagnostik, der Überwachung chemischer Reaktionen und in vielen anderen Forschungsbereichen eingesetzt.

Neben der Verwendung von magnetischen Beads als Grundgerüst besteht der größte Unterschied zwischen MPCLIA und herkömmlichen ELISA in der Chemilumineszenz als Nachweismethode. Durch eine chemische Reaktion, bei der Substanzen wie Meerrettichperoxidase (HRP) und Acridiniumester (AE) angeregt werden, werden Photonen freigesetzt, die mit einem speziellen Chemilumineszenz-Lesegerät gemessen werden können. Im Vergleich dazu haben CLIA-Methoden oft eine höhere Empfindlichkeit, Spezifität und lineare Bereiche über herkömmliche ELISA-Methoden hinaus.

Chemiluminescence Detection Mechanism

Chemiluminescence Detection Mechanism
https://doi.org/10.3390/foods12010196

Colorimetric (ELISA) Detection Mechanism

Colorimetric (ELISA) Detection Mechanism
https://doi.org/10.1007/s13317-017-0097-2
Produktliste
To assist with the development of your own MPCLIA, ACROBiosystems offers a range of magnetic beads and acridine esters that have been validated to be MPCLIA use throughout antibody drug development. We also offer chemiluminescence substrate solutions for both direct chemiluminescence (DCL) and enzyme-catalyzed luminescence (EL) to perform MPCLIA with high sensitivity and specificity.
ProdukttypKat. Nr.ProduktbeschreibungVorbestellung/Bestellung
Entwicklung Ihrer MPCLIA-Methode
MPCLIA ist eine äußerst vielseitige Methode, die in Verbindung mit unseren "universellen" magnetischen Beads, Acridinestern und Substratlösungen ein hohes Maß an Flexibilität bietet. Unsere magnetischen Beads, Acridinester und Substratlösungen wurden jeweils für die Verwendung mit MPCLIA validiert und werden ausgesprochen empfohlen, wenn Sie Ihren eigenen Assay entwickeln möchten. Unser umfangreicher Katalog von His/Fc-markierten, biotinylierten Proteinen und den dazugehörigen Antikörpern hilft Ihnen bei der Entwicklung des richtigen Assays. Hier sind einige MPCLIA-Entwicklungsstrategien, die von unserem professionellen Forschungsteam empfohlen werden: Nehmen Sie Kontakt mit uns auf oder fordern Sie bei Bedarf eine Verfahrensanweisung an!
Developing Your MPCLIA Method
Anwendungsszenarien
Assay-Nr.Magnetische BeadsProbe 1Probe 2MarkierungSubstratlösung
1Protein A-coupled Magnetic Beads
(Cat. No. MPC-A001)
Human AntibodyBiotinylated non-Fc tag proteinStreptavidin-Acridine ester
(Cat. No. STN-NA114)
Substrate Solution(AE Marker)
(Cat. No. ABK-001)
2hFc tag protein
3Protein G-coupled Magnetic Beads
(Cat. No. MPC-A002)
Human/Mouse AntibodyBiotinylated non-Fc tag protein
4Fc tag protein
5Anti-His-coupled Magnetic Beads
(Cat. No. MPC-A005)
His tag proteinBiotinylated non-His tag protein
6Human antibodyAnti-Human IgG-Acridine ester
(Cat. No. AHG-Y69)
7hFc tag protein
8Anti-Mouse IgG-coupled Magnetic Beads
(Cat. No. MPC-A003)
Mouse antibodyBiotinylated non-mFc tag proteinStreptavidin-Acridine ester
(Cat. No. STN-NA114)
9mFc tag protein
10*Mouse antibodyhFc tag proteinAnti-Human IgG-Acridine ester
(Cat. No. AHG-Y69)
11*mFc tag proteinHuman antibody
12*hFc tag protein
13Streptavidin-Magnetic Beads (recommended for MPCLIA)
(Cat. No. MPC-A006)
Biotinylated non-hFc tag proteinHuman antibody
14hFc tag protein
15Biotinylated non-mFc tag proteinMouse antibodyAnti-Mouse IgG-Acridine ester
(Cat. No. AMG-S163)
16mFc tag protein
17Anti-Human IgG-coupled Magnetic Beads
(Cat. No. MPC-A004)
Human antibodymFc tag protein
18hFc tag protein
19*hFc tag proteinMouse antibody
20*Human antibodyBiotinylated non-hFc tag proteinStreptavidin-Acridine ester
(Cat. No. STN-NA114)
21*hFc tag protein
Anmerkungen: Probe 1 sollte ein Protein/Antikörper sein, der an die Magnetische Beads binden kann;
                      Probe 2 sollte in der Lage sein, an den entsprechenden Marker zu binden;
                      Bestimmte Tests, die mit einem * gekennzeichnet sind, wurden von unserem Team nicht erprobt.
Daten zur Überprüfung
Analyse der PD-1-Bindung mit Human PD-L1
Analyse der PD-1-Bindung mit Human PD-L1

Immobilized 0.04 μg /Test of Biotinylated Human PD-1, Avitag,His Tag (recommended for biopanning) (Cat. No. PD1-H82E4) to the Streptavidin-Acridine ester (Cat. No. STN-NA114, 0.008 μg /Test), incubated with 100 μL /Test of Human PD-L1, Fc Tag (Cat. No. PD1-H5258) at increasing concentration coupled to Protein A-coupled Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A001) (10 μg beads/Test). Detection was performed with sensitivity of 3.125 ng/mL in Magnetic Particle Chemiluminescence immunoassay (MPCLIA) (KEYSMILE, SMART 6500S) (QC tested).

Cat. No.Product Description
PD1-H82E4Biotinylated Human PD-1 / PDCD1 Protein, Avitag™,His Tag (recommended for biopanning) (MALS verified)
STN-NA114Streptavidin Protein-Acridine ester (MALS verified)
PD1-H5258Human PD-L1 / B7-H1 Protein, Fc Tag (MALS verified)
MPC-A001Protein A-coupled Magnetic Beads (recommended for MPCLIA)

Analyse der PD-1-Bindung mit Human PD-L1

Immobilized 0.04 μg /Test of Biotinylated Human PD-1, Avitag,His Tag (recommended for biopanning) (Cat. No. PD1-H82E4) to the Streptavidin-Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A006, 20 μg beads/Test), incubated with 100 μL /Test of Human PD-L1, Mouse IgG1 Fc Tag, low endotoxin (Cat. No. PD1-H52A3) at increasing concentration coupled to Anti-Mouse IgG-Acridine ester (Cat. No. AMG-S163, 0.04 μg /Test). Detection was performed with sensitivity of 1.5625 ng/mL in Magnetism particulate chemiluminescence immunoassay (MPCLIA) (KEYSMILE, SMART 6500S) (QC tested).

Cat. No.Product Description
PD1-H82E4Biotinylated Human PD-1 / PDCD1 Protein, Avitag™,His Tag (recommended for biopanning) (MALS verified)
MPC-A006Streptavidin-Magnetic Beads (recommended for MPCLIA)
PD1-H52A3Human PD-L1 / B7-H1 Protein, Mouse IgG1 Fc Tag, low endotoxin (MALS verified)
AMG-S163Anti-Mouse IgG-Acridine ester (MALS verified)

Analyse der PD-1-Bindung mit Human PD-L1

Immobilized 0.04 μg /Test of Biotinylated Human PD-1 Protein, Avitag,His Tag (Cat. No. PD1-H82E4) to the Streptavidin-Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A006, 20 μg beads/Test), incubated with 100 μL /Test of Human PD-L1, Fc Tag (Cat. No. PD1-H5258) at increasing concentration coupled to Anti-Human IgG Antibody-Acridine ester (Cat. No. AHG-Y69, 0.04 μg /Test). Detection was performed with sensitivity of 0.488 ng/mL in Magnetism particulate chemiluminescence immunoassay (MPCLIA) (KEYSMILE, SMART 6500S) (QC tested).

Cat. No.Product Description
PD1-H82E4Biotinylated Human PD-1 / PDCD1 Protein, Avitag™,His Tag (recommended for biopanning) (MALS verified)
MPC-A006Streptavidin-Magnetic Beads (recommended for MPCLIA)
AHG-Y69Anti-Human IgG Antibody-Acridine ester (MALS verified)
Nachweis von SARA-CoV-2 Nukleokapsid durch Sandwich-MPCLIA
Nachweis von SARA-CoV-2 Nukleokapsid durch Sandwich-MPCLIA

When used the Chemiluminescent Substrate Solution (AE Marker) (Cat. No. ABK-001) in a sandwich MPCLIA Assay for detection of SARS-CoV-2, The Biotinylated Anti-SARS-CoV-2 Nucleocapsid Antibody, Mouse IgG1 (Cat. No. NUN-BM266) coupled Streptavidin-Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A006) was incubated with Acridine Ester-Labeled Anti-SARS-CoV-2 Nucleocapsid Antibody, Chimeric mAb, Human IgG1 (AM224) (Cat. No. NUN-M224) and treated with SARS-CoV-2 Nucleocapsid protein, His Tag (Cat. No. NUN-C5227) at increasing concentration, detection was performed using with sensitivity of 97.7 pg/mL in Magnetism particulate chemiluminescence immunoassay (MPCLIA) (KEYSMILE, SMART 6500S) (QC tested).

Cat. No.Product Description
ABK-001Chemiluminescent Substrate Solution (AE Marker)
MPC-A006Streptavidin-Magnetic Beads (recommended for MPCLIA)
NUN-C5227SARS-CoV-2 (COVID-19) Nucleocapsid protein, His Tag
Nachweis von Human IFN-gamma durch CLEIA
Nachweis von Human IFN-gamma durch CLEIA

When used the Chemiluminescent Substrate Solution (HRP Marker) (Cat. No. ABK-002) in a sandwich CLEIA Assay for detection of Human IFN-gamma, immobilized Monoclonal Anti-IFNγ antibody, Human IgG1 at 2 μg/mL, add increasing concentrations of Human IFN-gamma, premium grade (Cat. No. IFG-H4211) and then add Biotinylated Biotinylated Monoclonal Anti-IFNγ antibody, Human IgG at 0.05 μg/mL. Detection was performed using Streptavidin-HRP, Horseradish peroxidase conjugated Streptavidin (Cat. No. STN-NH913) with sensitivity of 7.8 pg/mL.

Cat. No.Product Description
ABK-002Chemiluminescent Substrate Solution (HRP Marker)
IFG-H4211Human IFN-gamma / IFNG Protein, premium grade
STN-NH913Streptavidin Protein-HRP, Horseradish peroxidase conjugated Streptavidin
MPCLIA bestätigte die hohe Stabilität und Empfindlichkeit der magnetischen Beads
MPCLIA bestätigte die hohe Stabilität und Empfindlichkeit der magnetischen Beads

Immobilized 0.04 μg /Test of Biotinylated Human PD-1, Avitag,His Tag (recommended for biopanning) (Cat. No. PD1-H82E4) to the Streptavidin-Acridine ester (Cat. No. STN-NA114, 0.008 μg /Test), incubated with 100 μL /Test of Human PD-L1, Fc Tag (Cat. No. PD1-H5258) at increasing concentration coupled to Protein A-coupled Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A001) (10 μg beads/Test). Detection was performed with sensitivity of 3.125 ng/mL in Magnetism particulate chemiluminescence immunoassay (MPCLIA) (KEYSMILE, SMART 6500S) (QC tested).

MPCLIA bestätigte die hohe Stabilität und Empfindlichkeit der magnetischen Beads

The MPCLIA assay shows that Protein G-coupled Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A002) is stable at 37°C for 10 days.

MPCLIA bestätigte die hohe Stabilität und Empfindlichkeit der magnetischen Beads

The MPCLIA assay shows that Anti-Human IgG-coupled Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A004) is stable after freezing and thawing 3 times.

MPCLIA bestätigte die hohe Stabilität und Empfindlichkeit der magnetischen Beads

The MPCLIA assay shows that Anti-His Tag-coupled Magnetic Beads (recommended for MPCLIA) (Cat. No. MPC-A005) is stable at 37°C for 10 days.

ACRO Quality

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