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Star Staining fluoreszenzmarkierte Produkte
Werkzeuge/Hilfsmittel der neuen Generation für den CAR-Nachweis

Star Staining-Fluorescent-labeled Products
Einführung
Star Staining fluoreszenzmarkierte Produkte werden mit einer ortsspezifischen Markierungstechnologie der neuen Generation in „Star Standard“ - Qualität entwickelt. Diese Produkte wurden speziell für den Nachweis und die Überwachung von CAR-T-Zellen in klinischen Studien entwickelt.
Ein fluoreszenzmarkiertes Protein ist ein leistungsfähiges Hilfsmittel zum Nachweis der CAR-Expression in Forschungs- und klinischen Proben durch Durchflusszytometrie. Diese Proteine sind vormarkierte Fluoreszenzfarbstoffe, die die CAR-Expression durch schrittweise Färbung mit minimalem Hintergrund erkennen können. Die Entwicklung qualitativ hochwertiger fluoreszenzmarkierter Proteine stellt jedoch eine große Herausforderung dar, wodurch es bisher nur wenige handelsübliche Produkte gibt.
Die Konjugationstechnik ist ein wesentlicher Engpass für die Entwicklung hochwertiger fluoreszenzmarkierter Proteine. Derzeit ist die am weitesten verbreitete Markierungstechnik auf dem Markt die traditionelle chemische Markierungsmethode. Es ist eine sehr einfache Methode, Proteine unspezifisch mit einem Fluoreszenzfarbstoff kovalent zu markieren. Eine zufällige Modifikation kann jedoch zu Heterogenität führen und die Bioaktivität des Proteine durch Blockieren der proteinaktiven Stelle beeinflussen. Studien weisen darauf hin, dass die ortsspezifische Markierungstechnologie der neuen Generation fluoreszierende Farbstoffe ortsspezifisch an spezifische Proteine binden kann. Damit wird die Einheitlichkeit der fluoreszenzmarkierten Produkte garantiert und eine Beeinträchtigung der Proteinaktivität vermieden. Diese Eigenschaft macht diese Technologie zu einer wertvollen Komponente bei der Entwicklung hochwertiger fluoreszenzmarkierter Proteinprodukte mit hoher Spezifität und Empfindlichkeit.
Produkteigenschaft
Traditionelle chemische Markierung
Traditional Chemical Labeling
Nicht-selektive zufällige Markierung und Auswirkung auf die natürliche Struktur
Kann die aktiven Stellen abdecken, um die Bioaktivität zu reduzieren
Leicht zu aggregieren aufgrund der Änderung der Hydrophilie von Proteinen
Hohe Schwankungen von Charge zu Charge
Ortsspezifische Markierung der neuen Generation
New-generation Site-specific Labeling
Die Markierung erfolgt am spezifischen Markierungspunkt und weit weg von den aktiven Stellen der Proteine
Beibehaltung der natürlichen Konformation und Modifizierung
Effiziente bio-orthogonale Technologie
Hohe Konsistenz und Einheitlichkeit von Charge zu Charge.
Merkmale des Star Staining

ACROBiosystems strebt die Entwicklung von Nachweisreagenzien mit hohem Standard an, um die Entwicklung der CAR-T-Zelltherapie zu unterstützen. Nach jahrelanger Forschung und Erfahrung unserer Labortechniker haben wir die ortsspezifische Markierungsplattform „Star Staining“ erfolgreich etabliert und eine Reihe exklusiver fluoreszenzmarkierter Proteine in „Star Standard“-Qualität entwickelt. „Star Staining“-Produkte können die leistungsstarken Hilfsmittel/Werkzeuge zum Nachweis und zur Überwachung von CAR-T-Zellen in klinischen Studien sein.

Verwendung einer ortsspezifischen Markierungstechnologie der neuen Generation zur Aufrechterhaltung der natürlichen Bioaktivität

Hohe Spezifität und Sensitivität, bestätigt durch Durchflusszytometrie

Keine unspezifische Bindung an nicht-transduzierte PBMCs

Hohe Konsistenz und Einheitlichkeit von Charge zu Charge

Neueste Produkte
  • FITC

  • PE

  • APC

  • Alexa Fluor 647

  • Alexa Fluor 555

  • Alexa Fluor 488

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Datenanzeige

Hohe Reinheit

Hohe Reinheit von mehr als 90 % des mit Star Staining FITC-markierten Human BCMA
BCMA SDS-PAGE

FITC-Labeled Human BCMA, His Tag (Cat. No. BCA-HF2H3) on SDS-PAGE under reducing (R) condition. The gel was stained overnight with Coomassie Blue. The purity of the protein is greater than 90%.

BCMA SEC-MALS

The purity of FITC-Labeled Human BCMA, His Tag (Cat. No. BCA-HF2H3) is more than 90% and the molecular weight of this protein is around 24-34 kDa verified by SEC-MALS.

Hohe Bioaktivität

Höhere Bindungsaktivität als bei Produkten anderer Wettbewerber
BCMA binding activity verified by FACS
CD19 binding activity verified by FACS

Binding activity of FITC-Labeled Human BCMA and CD19 protein from two different vendors were evaluated by the FACS analysis. The result showed that ACRO's Star Staining FITC-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3) and CD19 (Cat. No. CD9-HF2H3) protein have a much higher binding activity than that of the other competitor.

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Alexa Fluor 647-Labeled Human Mesothelin (296-580)

The activity of Alexa Fluor 647-Labeled Human Mesothelin (296-580), His Tag (Cat. No. MSN-HA2H5) was higher than other Competitor.


Alexa Fluor 488-Labeled Human Mesothelin / MSLN (296-580) Protein

The activity of Alexa Fluor 488-Labeled Human Mesothelin (296-580), His Tag (Cat. No. MSN-HA2H9) was higher than other Competitor.

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Star Staining PE-CD19- oder APC-CD19-Protein kann die CD19-CAR-Expression mit hoher Empfindlichkeit durch Durchflusszytometrie nachweisen.
APC-CD19 FACS binding activity verified by FACS

Anti-CD19 CAR-293 cells were stained with PE-Labeled Human CD19 (20-291) Protein (Cat. No. CD9-HP2H5), His Tag star staining and negative control protein respectively, PE signal was used to evaluate the binding activity.

PE-CD19 binding activity verified by FACS

Anti-CD19 CAR-293 cells were stained with APC-Labeled Human CD19 (20-291) Protein (Cat. No. CD9-HA2H9), His Tag star staining and negative control protein respectively, APC signal was used to evaluate the binding activity.

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Unspezifische Bindung an nicht-transduzierte PBMCs

Star Staining-Produkte haben keine unspezifische Bindung an nicht-transduzierte PBMCs mit einer höheren Bindungsaktivität als die Produkte anderer Wettbewerber
BCMA-PBMC  verified by FACS

Non-specific binding to non-transduced PBMCs between PE-Labeled Human BCMA Protein of Acro and competitor. 5e5 of non-transduced PBMCs were stained with PE -Labeled Human BCMA Protein and anti-CD3 antibody, washed and then analyzed with FACS. FITC signal was used to evaluate the expression of CD3+ T cells in non-transduced PBMCs, and PE signal was used to evaluate the non-specific binding activity to non-transduced PBMCs.

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BCMA PBMC comparison Data

Non-specific binding to non-transduced PBMCs between FITC-Labeled Human BCMA Protein of Acro and competitor. 5e5 of non-transduced PBMCs were stained with FITC-Labeled Human BCMA Protein and anti-CD3 antibody, washed and then analyzed with FACS. PE signal was used to evaluate the expression of CD3+ T cells in non-transduced PBMCs, and FITC signal was used to evaluate the non-specific binding activity to non-transduced PBMCs.

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Aufrechterhaltung der natürlichen Bioaktivität

Hohe Bindungskapazität vor und nach der Konjugation, bestätigt durch FACS und SPR
BCMA bioactivity verified by FACS

Binding activity of the Human BCMA before and after FITC labeling was evaluated in the above FACS analysis. The result shows that FITC-Labeled BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3) and unconjugated Human BCMA have almost the same level of binding activity.

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BCMA binding affinity  verified by SPR
FITC-BCMA binding affinity  verified by SPR

Binding affinity of the Human BCMA before and after FITC labeling was evaluated in the above SPR analysis (Biacore T200). The result shows that FITC-Labeled (Cat. No. BCA-HF2H3) and unconjugated Human BCMA, His Tag have almost the same level of affinity.

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Hohe Konsistenz von Charge zu Charge

Die Bindungsaktivität verschiedener Chargen von FITC/Alexa Fluor-555/PE-markiertem Human BCMA-Protein wurde durch FACS bestätigt
FITC-BCMA batch-to-batch consistency verified by FACS
AF555-BCMA  batch-to-batch consistency verified by FACS
PE-BCMA batch-to-batch consistency verified by FACS

Binding activity of different lots of FITC-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3) , AF555-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HA2H6) and PE-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HP2H7) against anti-BCMA CAR-293 cells was evaluated by flow cytometry. The result shows very high batch-to-batch consistency.

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Hohe Stabilität

PE-BCMA stability verified by FACS
FITC-BCMA stability verified by FACS

PE-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HP2H7) and FITC-Labeled Human BCMA (Cat. No. BCA-HF2H3)  25℃ for 48 hours and freeze-throw cycles are stable without performance reduction.

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VERWEISE

[1] Abbasov ME, Kavanagh ME, Ichu TA, et al. A proteome-wide atlas of lysine-reactive chemistry [published online ahead of print, 2021 Sep 9]. Nat Chem. 2021;10.1038/s41557-021-00765-4.

[2] Xu L, Kuan SL, Weil T. Contemporary Approaches for Site-Selective Dual Functionalization of Proteins. Angew Chem Int Ed Engl. 2021;60(25):13757-13777.

[3] Devabhaktuni A, Lin S, Zhang L, et al. TagGraph reveals vast protein modification landscapes from large tandem mass spectrometry datasets. Nat Biotechnol. 2019;37(4):469-479.

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